Rosi

При получении круглой сперматидной клетки, ее подготовке, введении в яйцеклетку и стимуляции яйцеклетки (использование устройства для электрослияния) Др. Используются техники, определенные Танакой и достигшие успеха.

В брюссельском центре ЭКО работает команда опытных лабораторий по применению метода ROSI.

Что означает азооспермия?

Сегодня азооспермия наблюдается примерно у 1% всех мужчин и у 10-15% мужчин с бесплодием. Описаны два состояния, вызывающие азооспермию; обструктивная (обструктивная азооспермия), то есть закупорка или недостаточность семявыбрасывающих протоков и необструктивная азооспермия.

При обструктивной азооспермии выработка сперматозоидов происходит в яичках, и сперматозоиды могут быть получены из яичек с помощью процессов microTESE, TESE или TESA со 100% успехом. В гистологии необструктивной азооспермии отмечаются случаи, когда в яичке отсутствует только клетка Сертоли, являющаяся вспомогательной клеткой в ​​продукции сперматозоидов, то есть отсутствуют спермопродуцирующие материнские клетки (зародышевые клетки). клетки останавливаются в развитии на одном из этапов образования сперматозоидов, либо семенные канальцы в яичках теряют свои свойства. В клеточном анализе, за исключением наличия клеток Сертоли в семенниках, т.е. полного отсутствия зародышевых клеток, в клеточном анализе можно использовать круглые или удлиненные сперматиды (очень мало сперматозоидов) для получения зрелых сперматозоидов в определенных областях или для интрацитоплазматической инъекции круглых сперматид (РОСИ-ЭЛСИ).Может быть обнаружено наличие незрелых-незрелых сперматозоидов с большой головкой, коротким хвостом.

К кому применяется ROSI?

Сегодня примерно 50% мужчин с необструктивной азооспермией могут иметь сперматозоиды, которые завершили свое созревание с помощью процедуры microTESE. Единственная надежда для остальных 50%, которые не могут найти зрелые сперматозоиды, стать отцом с клеткой, несущей собственный генетический материал, заключается в использовании при ИКСИ незрелых половых клеток, то есть круглых сперматид или крупноголовых удлиненных сперматид. , если есть продукция в яичках. Наличие незрелых клеток продемонстрировано примерно у 30% мужчин без сперматозоидов.

Формирование зрелого сперматозоида в яичках у мужчин обычно состоит из 4 стадий и занимает примерно 70-120 дней. В этом процессе зародышевая клетка (стволовая клетка, превращающаяся в сперматозоид — содержит 46 хромосом) претерпевает изменения структуры и формы и превращается в гаплоидный сперматозоид (содержащий 23 хромосомы), несущий генетический материал самца в яйцеклетку. Этот процесс очень сложен, и генетика (например, 46XXY-синдром Клайнфельтера, микроделеции Y-хромосомы, гонадный мозаицизм, генетические мутации) и гормональные изменения или факторы окружающей среды (воздействие токсического воздействия, стресс, неконтролируемое употребление анаболических стероидов) могут нарушить этапы производства спермы и в конечном итоге сперматозоиды. Это может вызвать уменьшение количества сперматозоидов или даже полное колебание в стадии незрелых сперматид / удлиненных сперматидных клеток сперматозоидов, которые не полностью превратились в зрелые сперматозоиды.

Как упоминалось выше, единственный способ стать отцом для мужчин, имеющих только круглые/удлиненные сперматиды в яичках или эякуляте, — это использовать эти клетки для инъекции в яйцеклетку, даже если вероятность успеха невысока.

Существуют ли какие-либо научные исследования, в которых применяется процедура ROSI? Каковы результаты?

Первые исследования с использованием круглых и/или удлиненных сперматид при инъекциях яйцеклеток относятся к исследованиям на животных. В первых исследованиях, особенно на моделях мышей, крыс и кроликов, хотя показатели успеха были низкими при инъекциях ROSI и ELSI, были достигнуты оплодотворение в яйцеклетках, развитие эмбрионов и, как следствие, живорождение. Первое живорождение, полученное с круглыми сперматидами у человека, относится к 1996 году, и во многих последующих исследованиях аппликации проводились с ROSI и ELSI, выделенными из эякулята и/или ткани яичка. Общим в этих исследованиях является то, что инъекции круглых сперматид имеют более низкие показатели успеха, чем удлиненные сперматиды. Кроме того, показатели достижения живорождения при полученных беременностях действительно низки. Большинство беременностей заканчиваются ранним выкидышем. Тот факт, что показатели успеха не находятся на желаемом уровне, напрямую связан с тем, что используемые клетки не полностью созрели. Показатели успеха тем выше, чем ближе используемые сперматидные клетки находятся по развитию к сперматозоидам. По этой причине исследователи особенно подчеркивают использование более совершенных сперматозоидов, то есть более близких по форме к зрелым сперматозоидам, даже если они не полностью созрели. Поэтому результаты, полученные с ЭЛСИ, более успешны, чем с РОСИ.

Хотя было предпринято много попыток с инъекциями ROSI и/или ELSI с 1996 года, когда начались первые исследования, до 2015 года родилось около 10 здоровых детей. Из-за этого интерес к ROSI/ELSI угас до двух новых исследований, опубликованных в 2015 и 2018 годах японским ученым Ацуши Танакой. В этих исследованиях внимание клиницистов и эмбриологов было обращено на то, что круглую инъекцию сперматидов следует рассматривать и рекомендовать в качестве последнего шанса в случаях необструктивной азооспермии.

Были ли обеспечены здоровые роды с помощью процедуры ROSI?

Др. Когда исследование Танаки сравнивали с первыми исследованиями, при инъекции круглых сперматид-ROSI было получено более высокое оплодотворение, лучшее качество развития эмбриона и, как результат, более здоровая беременность при родах. В результате примерно 954 испытаний экстракорпорального оплодотворения в 2600 случаях, участвовавших в исследовании, только 90 детей родились живорожденными, с вероятностью успеха около 5%. На самом деле этот показатель все еще очень низок, но, учитывая, что у мужчин с азооспермией нет другого выбора, результат впечатляет. С технической точки зрения именно различия в методе разделения круглых сперматид делают исследование более успешным, чем предыдущие исследования, а главное, более точную идентификацию круглых сперматид. Поэтому успех процедуры прямо пропорционален опыту эмбриолога в распознавании клетки. Кроме того, для стимуляции яйцеклеток при лечении использовалось электрофузионное устройство, подающее контролируемый электрический ток на яйцеклетку при определенных значениях напряжения. Это устройство направлено на увеличение скорости оплодотворения при инъекциях, сделанных с незрелыми клетками. 

Безопасна ли процедура ROSI?

Врожденные проблемы были обнаружены у 90 из 3 детей, родившихся в этом исследовании. Это заячья губа, омфалоцеле и дефект межжелудочковой перегородки. Частота этих проблем намного ниже у детей, рожденных в период между 1997 и 2005 годами в Японии, но, поскольку количество детей, рожденных после ROSI, очень мало, невозможно статистически сказать, что риск возникновения этих проблем у детей из-за ROSI процедура увеличена.

При двухлетних наблюдениях за когнитивным и физическим развитием детей было замечено, что они не отличались от детей, рожденных при нормальной беременности.

В настоящее время нельзя сказать, что процедура ROSI является полностью безопасной с медицинской точки зрения процедурой, так как количество детей, рожденных в результате процедуры ROSI, невелико, а сроки наблюдения за развитием короткие. Важно проводить исследования с долгосрочным наблюдением за развитием новорожденных, чтобы принять процедуру ROSI как безопасную практику.

Что нужно знать перед процедурой ROSI?

В результате показатели наступления беременности, полученные при переносе в матку эмбрионов, сформированных с использованием примитивных клеток, полученных из семенников или эякулята, не завершивших/завершивших созревание, низкие.

Показатель забрать ребенка домой с процедурой ROSI составляет примерно 5%.

После ROSI ни одна из яйцеклеток не может быть оплодотворена, или уровень оплодотворения может быть намного ниже, чем при обычных инъекциях спермы.

Ни одна из оплодотворенных яйцеклеток после ROSI не может оставаться жизнеспособной до стадии качественного эмбриона, либо качество развития сформировавшихся эмбрионов может быть намного ниже, чем при обычных инъекциях спермы.

У детей, родившихся после ROSI, д-р. Согласно исследованию Tanaka et al., увеличения аномалии обнаружено не было. Врожденные аномалии выявлены только у 3 детей. В ходе 2-летнего когнитивного и физического наблюдения не было обнаружено каких-либо заметных негативных явлений по сравнению с другими детьми.

Важно наблюдать за детьми, родившимися в результате ROSI, в течение многих лет, чтобы продемонстрировать, что процедура ROSI на сто процентов безопасна с медицинской точки зрения, и научные исследования в этой области продолжаются.